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歡迎體驗ELISA試劑盒新版,三月好發(fā)展
更新時間:2022-03-23   點擊次數:1186次

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目前,分子生物學正在并終肯定會讓我們對整個生命科學有一個全面而*的認識,其對免疫測定技術發(fā)展的影響也是直接而又有效的,它使我們對以前一些難以檢測的生物活性物質的測定變得輕而易舉,并且大大提高了檢測的靈敏度和特異性。

較早用于免疫測定的基因工程抗原是HBcAg和HBsAg,這兩種基因工程抗原的出現,較好地解決了抗HBc和HBe的測定問題。因為要從病毒本身去大量獲取這兩種純抗原較為困難,并且這一點對于難培養(yǎng)的病原微生物來說,如HIV、HCV和梅毒螺旋體等都有些共性。

 一、ELISA 

  HCV目前尚不能體外培養(yǎng),只能用基因工程或化學合成方法獲取HCV結構和非結構區(qū)的各種抗原片斷,已知HCV基因組有7個功能區(qū)組成:核心、E1、E2/NS1 NS2 NS3 NS4 NS5(有分為NS5a和NS5b)區(qū),合成抗原的優(yōu)點是易于純化,特異性好,抗原抗體反應強。

二、代抗HCV-ELISA

由美國ortho公司克隆C1003抗原幾個片斷與人超氧化物歧化酶(SOD)結合。用酵母從病毒基因組非結合區(qū)得到表達,表達為融合蛋白,亦作為包被固相載體。

抗原組合:NS4 區(qū)二個基因片斷為NS 5-1-1和C1003

特性:IgG抗C100在發(fā)病后數月后,才檢出,故不宜作早期診斷。

約由20%的病人不出現抗體。IgM抗-C100急性期檢出率只有64%。

C100的抗原性較弱,在HCV復制中,不能充分暴露宿主的免疫系統(tǒng)。

特異性和靈敏性較差。

三、第二代HCV-ELISA試劑盒

 用基因重組的HCV結構蛋白與非結構蛋白抗原包被固相載體。

抗原組合:核心區(qū)(C區(qū))多肽C22  NS區(qū)多肽C33  C1003和NS 5-1-1

增加C22區(qū)和C33區(qū)后,抗體出現早,有助早期診斷,提高陽性率。有利早期診斷。

C22是早期易出現病毒血癥

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四、第四代HCV-ELISA 試劑盒

美國新近推出一種包括HCV基因組7個功能區(qū)所有免疫決定基的單一融合蛋白,稱為多決定基融合抗原,采用表面活性劑處理分界病毒表面復合物,釋放HCV核心抗原      (core)并用ELISA法,靈敏度可達500拷貝/ml,已接近核酸擴增檢測水平。

 抗原組合:以Core和NS3作為主要檢測片斷(比例十分重要)加合成多肽NS4

 特點:

① 直接測Core抗原;

②不易發(fā)生變異;

③ 抗IgM 和IgG檢出率可達100%;

④ 特異性達99。8%靈敏度為100%。

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